雷蒙特实验室建设

分子生物学实验室建设整体方案

  分子生物学作为基因工程的上游技术,其实验的成果和准确性将决定下游所有的步骤和最终的实验结果。所以构建一个完备的分子生物学实验室是非常重要的。

  分子生物学实验室主要的作用是对分子生物学的基本分析操作,包括植物、动物、微生物DNA的提取与鉴定,动物组织的RNA的提取与鉴定,质粒DNA的提取与鉴定,PCR扩增,分子杂交技术,分子文库的构建等实验项目的原理及步骤。一般分子生物学实验室的组成有:化学实验室、洗涤菌室、无菌操作室(接种室)、培养室、细胞学实验室等。

  1、化学实验室(准备室):完成所使用的各种药品的贮备、称量、溶解、配制、培养基分装等。

  主要设备:药品柜、防尘橱(放置培养容器)、冰箱、天平、蒸馏水器、酸度计及常用的培养基配制用玻璃仪器

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  2、洗涤、灭菌室:完成各种器具的洗涤、干燥、保存、培养基的灭菌等。

  主要设备:水池、操作台、高压灭菌锅、干燥灭菌器(如烘箱)等。

  3、无菌操作室(接种室):主要用于植物材料的消毒、接种、培养物的转移、试管苗的继代、原生质体的制备以及一切需要进行无菌操作的技术程序。

  4、培养室:培养室是将接种的材料进行培养生长的场所。培养室的大小可根据需要培养架的大小、数目、及其他附属设备而定。其设计以充分利用空间和节省能源为原则。

  分子生物学实验室建设整体方案:

  一般分子生物学实验室常分为生化实验室与分子实验室,下面我们来看一下分子生物学实验室建设整体方案。

  1、生化实验室建设方案:

  室内设施的基本要求:一般设生化室、药品仪器室、办公室,室内应根据其功能的要求设置给排水、通风系统、电源插座和总电源控制开关,并安装漏电保护器。实验台、通风柜要求水、电到位,设有220V 的二孔、三孔插座各二个以上,实验员办公室不得设在化学实验室内。

  药品仪器室:防火、防潮等设施、有单独的危险品存放处,有防护设备和急救箱,室内设有通风换气装置,在仪器的上方一般要求有万向抽气罩或者原子吸收罩,在使用仪器进行实验操作时,可将废气排放到室外,面药品柜的顶部可装有排气系统。

  实验室家具:外观整洁,柜内的水管不外露,台面可装有水龙头及PP水槽、洗眼器、滴水架等,还应有电源保护装置,尺寸要求一致,色彩搭配美观,符合科学、实用化,台面及柜体应保持整洁。

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  2、分子生物实验室建设方案:

  试剂贮存和准备区:主要是作为贮存试剂的制备、试剂的分装和主反应混合液的制备,试剂和用于标本制作的材料应直接运送至该区,不得经过其它区域。试剂原材料需贮存在本区内,并在本区内制备成所需的贮存试剂。对气流压力的控制,本区并没有严格的要求。

  标本制备区:作为临床标本的保存、核酸(RNA、DNA)提取、贮存及其加入至扩增反应管和测定RNA时DNA的合成。其压力梯度要求为相对于临近区域为正压,以避免从邻近区域进入本区的气溶胶污染。另外,由于在加样操作中可能会发生气溶胶所致的污染,所以应避免在本区域内不必要的走动。

  扩增反应混合物配制和扩增区:主要是DNA扩增,已制备的DNA模板和合成的DNA和主反应混合液,制备成反应混合液等,也可以在本区域内进行。在PCR测定中,通常在扩增后须打开反应管。因此扩增有较高的污染危险性,因此本区的压力梯度要求为,相对于邻近区域为负压,以避免气溶胶从本区域漏出。

  扩增产物分析区:主要进行的操作为扩增片段的测定,如使用全自动封闭分析仪器检测,此区域可不设。应注意扩增产物污染来源,因此对本区的压力梯度的要求为,相对于临近区域为负压,以避免扩增产物从本区域扩散至其它区域。

  实验室配套设施:是保证实验工作的必要条件,根据各个实验室实验内容的不同配备相应的设备和仪器,如超净工作台、生物柜、离心机、加样器等。

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